د HPLC ناکامیو او حلونو لپاره خورا زیانمن شوی

د لوړ دقیق وسیلې په توګه ، HPLC کولی شي په اسانۍ سره ځینې کوچني ستونزې رامینځته کړي که چیرې دا د کارولو پرمهال په سمه توګه پرمخ نه وړل کیږي.یو له ډیرو عامو ستونزو څخه د کالم کمپریشن ستونزه ده.څنګه ژر تر ژره د غلط کروماتګراف ستونزه حل کړئ.د HPLC سیسټم په عمده ډول د ذخیرې بوتل، یو پمپ، یو انجیکټر، یو کالم، د کالم د تودوخې چیمبر، یو کشف کونکی او د معلوماتو پروسس کولو سیسټم لري.د ټول سیسټم لپاره، ستنې، پمپونه او کشف کونکي کلیدي برخې او اصلي ځایونه دي چې د ستونزو سره مخ دي.

د کالم فشار کلیدي هغه ساحه ده چې د HPLC کارولو په وخت کې نږدې پاملرنې ته اړتیا لري.د کالم فشار ثبات د کروماتګرافیک لوړ شکل، د کالم موثریت، د جلا کولو موثریت او د ساتلو وخت سره نږدې تړاو لري.د کالم فشار ثبات په دې معنی نه دی چې د فشار ارزښت په ثابت ارزښت کې ثابت دی، بلکه د فشار د تغیر حد د 345kPa یا 50PSI ترمنځ دی (کله چې د کالم فشار مستحکم وي او ورو ورو بدلیږي د ګریډینټ ایلیوشن کارولو ته اجازه ورکوي).ډیر لوړ یا ډیر ټیټ فشار د کالم فشار ستونزه ده.

د HPLC ناکامیو او حلونو لپاره خورا زیانمن شوی

1، لوړ فشار د HPLC په کارولو کې ترټولو عام ستونزه ده.دا پدې مانا ده چې د فشار ناڅاپي زیاتوالی.په عموم کې، لاندې دلیلونه شتون لري: (1) په عمومي توګه، دا د جریان چینل بندیدو له امله دی.پدې وخت کې، موږ باید دا په ټوټه ټوټه وڅیړو.a.لومړی، د ویکیوم پمپ داخلول پرې کړئ.پدې مرحله کې ، د PEEK ټیوب د مایع څخه ډک شوی و ترڅو د PEEK ټیوب د محلول بوتل څخه کوچنی و ترڅو وګوري چې ایا مایع په خپله خوښه څاڅي.که چیرې مایع په ورو ورو څاڅکي یا څاڅکي نه وي، د محلول فلټر سر بند شوی.درملنه: د نیم ساعت لپاره په 30٪ نایټریک اسید کې ډوب کړئ او په الټرا پاکو اوبو سره مینځل کړئ.که چیرې مایع په تصادفي ډول څاڅي ، د محلول فلټر سر نورمال دی او معاینه کیږي؛ب.د پاکولو والو خلاص کړئ ترڅو د ګرځنده مرحله د کالم څخه تیر نشي، او که فشار د پام وړ کم شوی نه وي، د فلټر سپین سر بند شوی.درملنه: فلټر شوي سپین سرونه لرې شوي او د نیم ساعت لپاره د 10٪ isopropanol سره سونیک شوي.داسې انګیرل کیږي چې فشار د 100PSI څخه ښکته کیږي، فلټر شوی سپین سر نورمال دی او معاینه کیږي؛ج.د کالم د وتلو پای لرې کړئ، که فشار کم نشي، کالم بند شوی.درملنه: که دا د بفر مالګې خنډ وي، 95٪ وینځئ تر هغه چې فشار نورمال وي.که چیرې خنډ د یو څه ډیر ساتل شوي موادو له امله رامینځته شي، د اوسني ګرځنده پړاو په پرتله قوي جریان باید د نورمال فشار په لور د چټکولو لپاره وکارول شي.که د پورتنۍ میتود سره سم د اوږدې مودې پاکولو فشار کم نشي، د کالم انلیټ او آوټ لیټ په پام کې نیول کیدی شي برعکس د وسیلې سره وصل شي، او کالم د ګرځنده مرحلې سره پاک کیدی شي.په دې وخت کې، که د کالم فشار لا هم کم شوی نه وي، د کالم د ننوتلو چاڼ پلیټ یوازې ځای په ځای کیدی شي، مګر کله چې عملیات ښه نه وي، دا د کالم اغیز کمولو المل کیږي، نو هڅه وکړئ لږ کار واخلئ.د سختو ستونزو لپاره، د کالم بدیل په پام کې نیول کیدی شي.

(2) د غلط جریان نرخ ترتیب: د جریان درست نرخ بیا تنظیم کیدی شي.

(3) د جریان ناسم تناسب: د جریانونو د مختلف تناسب د ویسکوسیت شاخص مختلف دی، او د لوړ ویسکوسیت سره د جریان اړوند سیسټم فشار هم لوی دی.که امکان ولري، د ټیټ ویسکوسیټي محلولونه بدل کیدی شي یا بیا تنظیم او چمتو شي.

(4) د سیسټم فشار صفر جریان: د مایع کچې سینسر صفر تنظیم کړئ.

2، فشار ډیر ټیټ دی (1) معمولا د سیسټم لیک له امله رامینځته کیږي.څه باید وکړئ: هر پیوستون ومومئ، په ځانګړې توګه د کالم په دواړو سرونو کې انٹرفیس، او د لیک ساحه ټینګه کړئ.پوسته لرې کړئ او د PTFE فلم په مناسب ځواک سره ټینګ یا لین کړئ.

(2) ګاز پمپ ته ننوځي، مګر فشار معمولا په دې وخت کې بې ثباته وي، لوړ او ټیټ وي.په جدي توګه، پمپ به د مایع جذبولو توان ونلري.د درملنې طریقه: د پاکولو والو خلاص کړئ او د 3 ~ 5ml/min په جریان کې پاک کړئ.که داسې نه وي، هوایی بلبلونه د اخراج والو کې د وقف شوي ستنې ټیوب په کارولو سره تمویل شوي.

(3) د ګرځنده مرحلې بهر جریان نشته: وګورئ چې ایا د زیرمو بوتل کې ګرځنده مرحله شتون لري ، ایا سنک په ګرځنده مرحله کې ډوب شوی ، او ایا پمپ روان دی.

(4) د حوالې والو تړل شوی نه دی: د حوالې والو د سستیدو وروسته تړل شوی.دا معمولا 0.1 ته ښکته کیږي.د حوالې والو له تړلو وروسته ~ 0.2mL/min.

لنډیز:

په دې مقاله کې، یوازې د مایع کروماتګرافي عام ستونزې تحلیل شوي.البته، زموږ په عملي غوښتنلیک کې، موږ به د نورو نورو ستونزو سره مخ شو.د غلطۍ په اداره کولو کې، موږ باید لاندې اصول تعقیب کړو: یوازې په یو وخت کې یو فکتور بدل کړئ ترڅو د فرضي عامل او ستونزې ترمنځ اړیکه معلومه کړي؛عموما، کله چې د ستونزو د حل لپاره د برخو ځای په ځای کول، موږ باید د ضایع کیدو مخنیوي لپاره د ویجاړ شوي پاتې برخې بیرته ځای پرځای کولو ته پام وکړو؛د ښه ریکارډ عادت جوړول د غلطۍ سمبالولو بریالیتوب کلیدی دی.په پایله کې، کله چې د HPLC کارول، دا مهمه ده چې د نمونې دمخه درملنې او د تجهیزاتو مناسب عملیات او ساتنې ته پاملرنه وشي.